雙光束紫外可見分光光度計是一種常用的實(shí)驗(yàn)室儀器，用于測量物質(zhì)在紫外和可見光范圍內(nèi)對光的吸收和透射性質(zhì)。它基于分光技術(shù)和光電檢測技術(shù)，能夠準(zhǔn)確地測量樣品溶液或氣體的吸收光譜，并提供豐富的光學(xué)參數(shù)。其原理基于比較法和比色法。
 

　　比較法：分光光度計使用的是雙光束設(shè)計。它將參考光與樣品光同時照射在檢測器上。檢測器通過光電效應(yīng)將光信號轉(zhuǎn)化為電信號，并將兩個信號進(jìn)行比較。當(dāng)樣品溶液對某個特定波長的光吸收較少時，參考光和樣品光的強(qiáng)度差異很小，電信號也相近。當(dāng)樣品溶液對這個波長的光吸收增加時，樣品光的強(qiáng)度減弱，從而導(dǎo)致參考光和樣品光之間的強(qiáng)度差異增大，電信號也相應(yīng)增大。
 

　　比色法：雙光束紫外可見分光光度計也可以采用比色法測量。在該方法中，使用一個底物試劑或標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，并針對特定反應(yīng)選擇一個適當(dāng)?shù)牟ㄩL。當(dāng)?shù)孜镌噭┡c樣品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)時，會產(chǎn)生染色反應(yīng)，并在特定波長下吸收光線。通過測量吸光度的變化，可以確定樣品的濃度或反應(yīng)的程度。

 

　　雙光束紫外可見分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)由光源、單色器、光束分離器和探測器組成。光源產(chǎn)生寬帶光源(通常包含紫外和可見光)，單色器根據(jù)需要選擇特定波長的光線，光束分離器將光線分成參考光和樣品光，光電二極管探測器負(fù)責(zé)測量光的強(qiáng)度。通過檢測器獲得的光信號轉(zhuǎn)化為電信號后，通過一系列的電路處理和轉(zhuǎn)換，可以得到吸光度(Absorbance)或透光度(Transmittance)值。可以利用這些數(shù)值制作吸收光譜圖、透射光譜圖或濃度-吸光度曲線等。進(jìn)一步的數(shù)據(jù)分析包括峰值尋找、吸收峰面積計算和濃度計算等。